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Tesis

Metabolic engineering of oleaginous yeast for the production of biofuelsIngeniería metabólica de levadura oleaginosa para la producción de biocombustibles

Resumen

En esta investigación se estudiaron las estrategias de la ingeniería metabólica para desarrollar una plataforma de producción de biodiesel empleando la levadura oleaginosa Yarrowia lipolytica. Se establecieron nuevas herramientas genéticas para diseñar el microorganismo. Se comenzó con una expresión de vector que utiliza las características genéticas desde el factor de elongación 1-a (TEF). Asimismo, se desarrolló un plásmido complementario que permite la integración múltiple de plásmidos.

El análisis bioinformático de genes intrónicos en levadura similar a los ascomicetos identificó relaciones entre rutas funcionales y enriquecimiento intrónico, documentando el viaje evolutivo de las especies de levadura. Se examinaron los siguientes blancos genéticos (gene targets) dentro de la ruta de síntesis de lípidos: acetil-coA carboxilasa (ACC), delta-9 desaturasa (D9), ATP-citrato liasa (ACL) y diacilglicerol aciltransferasa (DGA).

Una investigación combinatoria reveló el orden de contribución de la sobreproducción de lípidos (de menor a mayor): DGA, ACC, D9, ACL. El escalado de la fermentación por lotes de cepas seleccionadas presentó una producción y una acumulación excepcionalmente altas. Estos resultados demostraron el balance entre el crecimiento celular y la producción de lípidos, la cual se venía modificando mediante estas manipulaciones genéticas.

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