Resumen

El ganado bovino supershedding excreta Escherichia coli O157:H7 (O157) a ≥ 104 unidades formadoras de colonias/g de heces. Recientemente hemos demostrado que una cepa de O157 supersedimentada (SS-O157), la SS-17, se hiperadhiere a las células epiteliales escamosas de la unión rectoanal (RAJ), lo que puede contribuir a que la SS-O157 persista en este lugar en mayor número, aumentando así la carga fecal de O157 que caracteriza el fenómeno de supersedimentación. Para verificar si este sería el perfil de adherencia característico de cualquier SS-O157, probamos aislados SS-O157 adicionales (n = 101; cada uno de un animal diferente) en el ensayo de adherencia celular RSE. De forma similar al SS-17, los 101 SS-O157 mostraron una adherencia agregativa en las células RSE, con 56 adherencia fuerte (>10 bacterias/célula; hiperadherente) y 44 adherencia moderada (1-10 bacterias/células). La tipificación de cepas mediante el análisis de secuencias de tipificación amplificada polimórfica (PATS) asignó los 101 SS-O157 a 5 clados principales, pero no a ningún genotipo predominante. Curiosamente, el 69% de las cepas SS-O157 aisladas eran idénticas a las cepas humanas del brote O157 según los perfiles de electroforesis en gel de campo pulsado (base de datos PulseNet de los CDC), se agruparon en dos clados mediante PATS que las distinguía de las restantes SS-O157, y eran hiperadherentes en células RSE. Se analizó la resistencia a los antibióticos (RA) de un subconjunto de aislados SS-O157 (n = 53) que representaban diferentes PATS y perfiles de adherencia a células RSE. Varios SS-O157 (30/53) mostraron resistencia al sulfisoxazol, y un aislado fue resistente tanto al sulfisoxazol como a la tetraciclina. Las pruebas de concentración inhibitoria mínima (CIM) confirmaron algunas de las resistencias observadas mediante la prueba de difusión en disco de Kirby-Bauer. Cada aislado SS-O157 portaba al menos 10 genes asociados a la RA. Sin embargo, rara vez se amplificaron genes directamente asociados a la RA: aac (3)-IV en 2 cepas, sul2 en 3 cepas y tetB en una cepa. El gen de la integrasa, int, relacionado con la adquisición/transmisión de RA basada en el integrón, se identificó en el 92% de los aislados de SS-O157. Nuestros resultados indican que las cepas SS-O157 podrían persistir durante más tiempo en la RAJ bovina, pero presentan una resistencia limitada a los antibióticos clínicos.

• Materias:Microbiología de alimentos Microbiología Bacteriología Propiedades farmacológicas Virología
• Subjects:Food microbiology Microbiology Bacteriology Pharmacological Properties Virology
• Palabras claves:Aislados O157, O157, células RSE, prueba de difusión en disco de Bauer, ensayo de adherencia de células RSE, perfiles de adherencia de células RSE, cepas humanas del brote O157, perfiles de electroforesis en gel de campo pulsado, base de datos PulseNet de los CDC, Escherichia coli O157.
• Keywords:O157 isolates, O157, RSE cells, Bauer disk diffusion test, RSE cell adherence assay, RSE cell adherence profiles, human O157 outbreak strains, pulsed field gel electrophoresis profiles, CDC PulseNet Database, Escherichia coli O157