La fabricación de un andamio adecuado es fundamental para recapitular la arquitectura y la funcionalidad del tejido nativo. En este estudio, intentamos crear una alineación favorable de las fibras de colágeno y un multilaminar con capas orientadas uniaxialmente, utilizando un colector de disco al girar las esteras 90 grados horizontalmente en momentos específicos. Se utilizaron diferentes concentraciones de colágeno tipo I derivado de la cola de rata (3, 6, 8% p/v) en 1,1,1,3,3-hexafluoroisopropanol (HFIP) para asuntos de electrospinning. Se seleccionó el colágeno al 6% p/v a un voltaje aplicado de 20 kV y una rotación del colector de 2500 rpm para mostrar nanofibras homogéneas sin cuentas con un grosor de fibra de 0,14 ± 0,4 µm, un grosor máximo de 0,5 ± 0,08 µm y una porosidad del 60%. Además, las imágenes del microscopio electrónico de barrido de las fibras electrospun mostraron un andamio multilaminar 3D con una bondad del 96,5% ± 0,8 en cada capa de fibras alineadas y orientadas uniaxialmente. La reticulación de las fibras de colágeno con clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N0-etilcarbodiimida (EDC)/N-hidroxisuccinimida (NHS) redujo la tasa de degradación de las fibras y preservó su morfología y alineación. La estera multilaminar mostró un aumento significativo de la resistencia a la tracción y del alargamiento medio de rotura en comparación con la estera unilaminar. El cultivo celular in vitro, utilizando células madre mesenquimales derivadas de tejido adiposo humano (hAT-MSCs) sobre el andamio reticulado, mostró una mejora en la proliferación celular, la adhesión, la migración y la unión intercelular con una morfología aplanada. Los espectros Raman revelaron la conservación de la estructura del colágeno. Además, los espectros Raman del andamio que contenía células eran los mismos que los de un disco intervertebral intacto como muestra a utilizar en los tejidos de ingeniería. En conclusión, nuestros resultados mostraron que el andamio nanofibroso de colágeno multilaminar 3D es más apropiado para los tejidos que tienen estructura multilaminar.
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