Las isoflavonas y los isoflavandioles han demostrado numerosos beneficios para la salud, como la reducción de las enfermedades cardiovasculares, el cáncer, las enfermedades relacionadas con la edad y la osteoporosis. Sin embargo, para investigar las relaciones entre el consumo de isoflavonas y sus beneficios para la salud, es importante poder cuantificar con precisión la exposición en el gran número de muestras que suelen producirse en los estudios de asociación (es decir, varios miles). Los métodos actuales se basan en protocolos de extracción en fase sólida para la limpieza de las muestras, lo que se traduce en tiempos de extracción y análisis prolongados. Aquí describimos un método rápido y sencillo de preparación de muestras de orina humana para la posterior cuantificación de daidzeína, genisteína (isoflavonas) y equol (isoflavandiol) mediante LC-MS/MS. La preparación de las muestras implica únicamente la adición de dimetilformamida (DMF) y ácido fórmico (AF) tras la hidrólisis enzimática de sus metabolitos mediante una mezcla de β-glucuronidasa y sulfatasa. El método se validó mediante precisión, linealidad, exactitud, recuperaciones, límite de detección (LOD) y límite de cuantificación (LOQ). Se han mostrado curvas de calibración lineales para daidzeína, genisteína y equol. Los valores de los coeficientes de correlación son r2 > 0,99 para daidzeína, genisteína y equol. El LD para la daidzeína y la genisteína fue de 1 ng/ml y para el equol de 2 ng/ml. Las recuperaciones fueron >90%, y la desviación estándar relativa intradía (<10%) e interdiaria (≤20% en 10 días) fue buena. Este método es adecuado para la cuantificación de isoflavonas y del metabolito microbiano equol en orina humana y es particularmente útil cuando se requiere analizar un gran número de muestras.
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